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高鹽誘導鹽敏感高血壓大鼠模型

健明迪檢測提供的高鹽誘導鹽敏感高血壓大鼠模型,討論與結(jié)論 動物癥狀觀察: 表現(xiàn)為體重減輕、弓背豎毛,在回輸后的一個月后死亡,具有CMA,CNAS認證資質(zhì)。
高鹽誘導鹽敏感高血壓大鼠模型
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討論與結(jié)論

動物癥狀觀察:

表現(xiàn)為體重減輕、弓背豎毛,在回輸后的一個月后死亡。

生物安全性

實驗中涉及動物的操作程序已經(jīng)得到中國醫(yī)學科學院醫(yī)學實驗動物研究所實驗動物使用與管理委員會的批準(ILAS-GC-2012-001)。

評價驗證

1. 高鹽飲食對血壓的影響

高鹽(8%的NaCl)喂養(yǎng)2周后,Dahl/鹽敏感大鼠血壓開始升高,4周后,鹽敏感大鼠高鹽喂養(yǎng)組血壓顯著高于對照組,而鹽敏感對照大鼠組血壓差異不顯著。

圖1. 高鹽和低鹽喂養(yǎng)后,鹽敏感性血壓大鼠和對照大鼠血壓的變化

(注:* P<0.05, Dss+High saltvs. control+High salt, t test n=5;#P<0.05 vs.Dss+High salt vs. Dss+Low salt, t test, n=5)

2. 腎臟組織病理結(jié)果

Dahl/鹽敏感大鼠高鹽(8%的NaCl)喂養(yǎng)4周后,腎小管萎縮,敏感對照大鼠腎組織未見明顯損傷。

圖2.大鼠腎臟組織HE染色(×400倍)

3. 炎癥細胞浸潤

Dahl/鹽敏感大鼠高鹽(8%的NaCl)喂養(yǎng)4周后,CT3標記的T淋巴細胞及CD68標記的巨噬細胞在腎組織中表達顯著多于對照組,腎臟發(fā)生炎癥反應。

圖3.大鼠腎臟組織CD3(T淋巴細胞)和CD68(巨噬細胞) 免疫組化(×400倍)

4. 血小板相關指標的測定

4.1 血小板活化測定:流式細胞術檢測發(fā)現(xiàn)Dahl/鹽敏感大鼠高鹽(8%的NaCl)喂養(yǎng)4周后,P-選擇素表達顯著高于其它組,血小板發(fā)生活化;

圖4. 鹽敏感大鼠和對照大鼠高鹽喂養(yǎng)和低鹽喂養(yǎng)后血小板活化(注:*P<0.05, Dss-H vs. others, one-way ANOVA, Scheffe`s test,n=5)

4.2 血小板內(nèi)鈣離子濃度的測定:血小板內(nèi)鈣離子濃度Dahl/鹽敏感大鼠高鹽(8%的NaCl)喂養(yǎng)組顯著高于其它組。

圖5. 鹽敏感大鼠和對照大鼠高鹽喂養(yǎng)和低鹽喂養(yǎng)后血小板內(nèi)Ca2+的濃度(注:*P<0.05, Dss-H vs. others, one-way ANOVA, Scheffe`s test,n=5)

4.3 血小板細胞膜離子通道NHE-1表達量的變化:Dahl/鹽敏感大鼠高鹽(8%的NaCl)喂養(yǎng)組血小板細胞膜的那氫交換體1的表達量顯著高于其它組。

圖6. 鹽敏感大鼠和對照大鼠高鹽喂養(yǎng)和低鹽喂養(yǎng)后血小板細胞膜NHE-1蛋白的表達(注:*P<0.05, Dss-H vs. others, one-way ANOVA, Scheffe`s test,n=5)

5.腎臟炎癥因子IL-6的表達

免疫印跡結(jié)果顯示,Dahl/鹽敏感大鼠高鹽(8%的NaCl)喂養(yǎng)組腎臟IL-6的表達顯著高于其它組。

圖7. 鹽敏感大鼠和對照大鼠高鹽喂養(yǎng)和低鹽喂養(yǎng)后大鼠腎臟內(nèi)IL-6的表達

(注:*P<0.05, Dss-H vs. others, one-way ANOVA, Scheffe`s test,n=5)

制備方法

1.Dahl/鹽敏感大鼠(Dahl/SS),名稱:SS/JrHsdMcwiCrlVr,近交系(Inbred Rat)

品系來源 :1962年,Brookhaven國家實驗室的LK Dahl從SD封閉群中選育出對NaCl引發(fā)的高血壓敏感/抗性的大鼠種群,1986年,俄亥俄醫(yī)學院的John P Rapp利用該核心群得到Dahl 鹽敏感/抗性大鼠,Harlan實驗室從俄亥俄醫(yī)學院引進, Theodore Kurtz(UCSF, CA)從SS/Jr種群中一組同品系的對照Dahl/SS大鼠近交得到 Dahl /鹽敏感大鼠,1991年以后,威斯康星醫(yī)學院一直維持該種群 2001年引入Charles River ,2011年維通利華從Charles River引入第17代核心群。

2.鹽敏感大對照鼠SS-13BN Rat,名稱:SS-Chr13BN/McwiCrlVr,同類系(Consomic Rat)。

3.誘導方法:6周齡Dahl/鹽敏感大鼠及鹽敏感對照大鼠SS-13BN,分別給予高鹽飲食(8%的NaCl)和低鹽飲食(0.12%的NaCl),連續(xù)4周,每周測量血壓。

研究背景

高血壓是由多基因、多環(huán)境因素及個人不良習慣相互作用而導致的一種慢性復雜疾病,也是危害人類健康的主要疾病之一。鹽是高血壓的重要環(huán)境因素,個體對鹽負荷或限鹽呈現(xiàn)不同的血壓反應,因此存在鹽敏感性問題。鹽敏感性是高血壓、心腦血管病和其它疾病(如哮喘、胃癌和腎功能不全等)發(fā)病及致死的一個潛在危險因素。因此在高血壓臨床診治過程中,考慮鹽敏感性將有利于對高血壓分類、危險分級以及對癥治療。

鹽敏感性通常涉及人口、種族、社會因素以及腎功能、激素水平和飲食習慣等。不同種族和人群鹽敏感性個體的檢出率不同,而且血壓的鹽敏感性隨年齡增長而變化,特別是高血壓患者。鹽敏感性由Weinberger給出定義:靜脈滴注2L生理鹽水,測量平均動脈壓(MAP),次日早晨給予低鈉飲食后再測量MAP,兩次MAP相差≥10mmHg為鹽敏感性,否則為鹽耐受性。Yatabe定義鹽敏感指數(shù)(SSI)為低鹽和高鹽飲食后MAP的差值與低鹽飲食MAP的商,若SSI≥5%為鹽敏感性。

對于鹽敏感性高血壓患者,高鹽攝入引起血壓升高主要有兩方面原因:一方面是腎小管對Na+ 重吸收增加,導致水鈉潴留,血漿容量增加,從而血壓升高;另一方面是內(nèi)源性哇巴因物質(zhì)分泌增多,特異性抑制鈉泵,胞內(nèi)鈉離子濃度增加,Na+/Ca2+交換體被激活,細胞內(nèi)Ca2+ 濃度升高,最終導致血管平滑肌或心肌收縮,引起高血壓。

模型信息

中文名稱:高鹽誘導鹽敏感高血壓大鼠模型

英文名稱:SS/JrHsdMcwiCrlVr

類型:高血壓動物模型

分級:NA

用途:用于高血壓研究。

研制單位:中國醫(yī)學科學院醫(yī)學實驗動物研究所

保存單位:中國醫(yī)學科學院醫(yī)學實驗動物研究所

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