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條件性RNVU1-18 過表達小鼠模型

健明迪檢測提供的條件性RNVU1-18 過表達小鼠模型,討論與結(jié)論 該模型通過長期觀察普通狼瘡小鼠模型,待其到40周齡時,檢測其dsDNA等,結(jié)合皮膚癥狀變化,來確定慢性狼瘡皮膚病模型的建立,具有CMA,CNAS認證資質(zhì)。
條件性RNVU1-18 過表達小鼠模型
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討論與結(jié)論

該模型通過長期觀察普通狼瘡小鼠模型,待其到40周齡時,檢測其dsDNA等,結(jié)合皮膚癥狀變化,來確定慢性狼瘡皮膚病模型的建立。目前國際上尚欠缺類似模型,為研究狼瘡皮膚病發(fā)病機制提供了工具。

生物安全性

模型動物飼養(yǎng)在武漢大學人民醫(yī)院動物房SPF級動物實驗室,實驗動物使用許可證SYXK(鄂)2015-0027。

(1)建筑特點

門采用專用凈化密閉門并配備觀察窗。單向走道呈順時針走向設(shè)計。屏障系統(tǒng)內(nèi)共有大鼠飼養(yǎng)室1間,小鼠飼養(yǎng)室3間,隔離觀察室1間,實驗準備室1間,潔物存放室1間,清洗消毒室1間。此外,屏障系統(tǒng)外配有監(jiān)控室、機房和配電室等。

(2)設(shè)計參數(shù)

室內(nèi)溫度:20~26°C;日溫差:≤4°C;相對濕度:40%~70%;換氣次數(shù):15~20次/h;氣流速度:≤0.2m/s;壓強梯度:20~50Pa;空氣潔凈度:7級;菌落數(shù):≤3個/皿;氨濃度:≤14mg/m3;噪聲:≤60dB;Z低工作照度:≥200lx;動物照度:15~20lx;晝夜明暗交替時間:12/12h。

(3)通風和空調(diào)系統(tǒng)

動物實驗室采用全新風中央空調(diào)通風系統(tǒng)。空氣經(jīng)過初、中、三級過濾器后進入實驗室內(nèi)環(huán)境。

(4)照明系統(tǒng)

一更、淋浴、二更、氣閘、清潔走道、潔物存放處、污物走道、緩沖間和清洗消毒間、動物飼養(yǎng)室、實驗準備間、隔離觀察室和功能實驗室等安裝有手動和自動開關(guān),根據(jù)實際需要,調(diào)節(jié)控制室內(nèi)照明燈。未啟用房間、清潔走道、潔物存放處、污物走道等在每日中午12點和晚上8點開啟紫外線燈照射1h。

(5)通訊系統(tǒng)

因為SPF級動物實驗室的環(huán)境和設(shè)施具有特殊要求,人員進入后不能隨意出入,而室內(nèi)外的聯(lián)系又十分重要,故室內(nèi)各房間均安裝內(nèi)部電話機,按照房間順序編排電話號碼,各室內(nèi)電話可相互連通,并均與監(jiān)控室總機保持聯(lián)系,保證實驗室內(nèi)外信息的及時溝通。

(6)監(jiān)控系統(tǒng)

對SPF級動物實驗室的出入口、走道、實驗動物飼養(yǎng)室、功能操作室等重要位置均安裝了可作270°旋轉(zhuǎn)的攝像機,能夠及時了解設(shè)施的運行狀態(tài);也能有效督促實驗人員執(zhí)行科學的操作規(guī)程,避免人為因素造成室內(nèi)環(huán)境和設(shè)施的污染;并對整個實驗期間的動物狀態(tài)和反應(yīng)進行觀察,減少對動物的滋擾。

(7)供水系統(tǒng)

SPF級實驗動物飲用水以純凈水為宜。本實驗室采用管道供水,將處理后的純凈水用塑膠管道輸送到屏障系統(tǒng)內(nèi)實驗準備室,設(shè)置接水槽,為實驗動物供應(yīng)滅菌的飲用水和屏障系統(tǒng)內(nèi)用水。要經(jīng)常更換和清洗輸水管道,清洗籠具的用水添加適當比例的84消毒液。

(8)供電系統(tǒng)、警報系統(tǒng)和消防設(shè)施

SPF級動物實驗室要求全天候不間斷供風和供電,如果出現(xiàn)故障,不能及時發(fā)現(xiàn)和處理,就可能導致環(huán)境設(shè)施的污染、動物感染或死亡,造成嚴重后果。因此應(yīng)對SPF級動物實驗室使用獨立穩(wěn)定的供電系統(tǒng),并配備有應(yīng)急電源。在中央空調(diào)機房控制室安裝風機故障警報系統(tǒng),以便及時檢修和維護,保證設(shè)施的安全運行。

(9)消毒滅菌設(shè)備

為防止外界物品進入SPF級動物實驗室時所攜帶的細菌污染室內(nèi)環(huán)境和造成動物交叉感染,按照不同物品的特性,進行紫外線照射消毒、渡槽消毒液消毒或?qū)S玫臋C動門真空滅菌器消毒。

(10)動物飼養(yǎng)籠具

飼養(yǎng)大、小鼠的籠具聚碳酸脂材料的塑膠籠具,具有高透明、耐高壓、耐高溫、耐酸堿等特點。通用的不銹鋼籠具長、寬、高分別為40、30、20cm,適用于單籠飼養(yǎng)有特殊要求的實驗動物,配有底盤和食槽,確保實驗動物有充足的采食和活動空間,同時也保證室內(nèi)環(huán)境的清潔。

(11)墊料的選擇和使用

在使用塑膠墊料時,墊料是大小鼠直接接觸的鋪墊物,起到吸濕、保暖和造窩的作用。墊料的好壞直接影響到大小鼠術(shù)后的恢復、生長發(fā)育和繁殖性能。目前,所使用的墊料主要有玉米秸墊料、刨花墊料。

(12)飼料配制

大小鼠的生產(chǎn)型飼料和維持型飼料必須嚴格按照國家標準,進行科學配制生產(chǎn)。每半年檢測一次飼料的微生物指標和有效營養(yǎng)成分指標,保證飼料的質(zhì)量。

評價驗證

RNVU1-18屬于U1小核RNA(snRNA)的假基因。U1 snRNA作為核糖核蛋白(RNP)復合體的一部分,是剪接體的重要組成部分,負責pre-mRNA的剪接。同時,可促進轉(zhuǎn)錄起始、以抑制多聚腺苷酸化等。

制備方法

F0代構(gòu)建:

研究背景

RNVU1-18屬于U1小核RNA(snRNA)的假基因。U1 snRNA作為核糖核蛋白(RNP)復合體的一部分,是剪接體的重要組成部分,負責pre-mRNA的剪接。U1 snRNA的5 '端和5 '剪接位點堿基對,位于內(nèi)含子的5 '端外顯子/內(nèi)含子交界處,并定義了第一次分裂發(fā)生的位置。除此之外,U1 snRNA具有額外的生物學作用,包括:U1 snRNA與TFIIH復合體的cyclin H成分相互作用,并通過增強一般轉(zhuǎn)錄因子與蛋白編碼基因啟動子的關(guān)聯(lián)來促進轉(zhuǎn)錄起始;當U1 snRNP與位于末端外顯子下游的隱性5 ' s結(jié)合時,可以抑制多聚腺苷酸化;U1 snRNP也可以保護早期轉(zhuǎn)錄本免受發(fā)生在pre-mRNA轉(zhuǎn)錄本體內(nèi)隱聚(A)位點的過早切割/聚腺苷酸化事件。在人類中,U1 snRNA基因是由位于1號染色體短臂上的多基因家族編碼的。此外,大量的U1 snRNA假基因存在于整個基因組中。U1 snRNA假基因有三種不同的類型,它們由DNA和RNA介導的機制產(chǎn)生。其中U1 snRNA I類偽基因與U1 snRNA基因有相當多的5 '和3 '側(cè)翼序列同源性,并與兩個基本啟動子元件,遠端序列元件(DSE)和近端序列元件(PSE)保持良好的同源性。假基因定位于1號染色體長臂上的一個單獨位置(1q12-21) 。經(jīng)序列分析,RNVU1-18編碼一種與U1 snRNA相同的snRNA,因此可能參與了U1 snRNA池的作用,這說明哺乳動物細胞中很大一部分的U1 snRNA可能來自于vU1 snRNA基因。

模型信息

中文名稱:條件性RNVU1-18 過表達小鼠模型

英文名稱:RNVU1-18 conditional expressing mouse model

類型:代謝性疾病動物模型

分級:NA

用途:用于代謝相關(guān)疾病研究。

研制單位:中國醫(yī)學科學院醫(yī)學實驗動物研究所

保存單位:中國醫(yī)學科學院醫(yī)學實驗動物研究所

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